綠膿桿菌是能夠引起急性、高度傳染性疾病的、 可以導(dǎo)致水貂出血性肺炎的一種細(xì)菌。本菌革蘭氏 染色呈陰性,單個(gè)、成雙或短鏈狀存在,能單向運(yùn) 動(dòng),無芽孢,能形成莢膜,能分泌綠膿菌素和熒光素。超凈工作臺(tái)(SW.CJ.2FD)購自上海博迅實(shí)業(yè) 有限公司醫(yī)療設(shè)備公司;空氣恒溫?fù)u床(KYC111) 購自上海?,攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;PCR 儀(T100TM Thermal Cycler)購自伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公 司;電熱恒溫水槽(DK-8D)購自上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè) 備有限公司;隔水式培養(yǎng)箱(BG-160)購自上海博 迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;光學(xué)正置顯微鏡(Axio Lab. A1)購自卡爾蔡司公司。
將綠膿桿菌菌種復(fù)蘇后分別用接種環(huán)劃線接種 于 PYG 平板,置 37 ℃培養(yǎng) 18 h。各挑取單菌落再 次分別劃線接種于 PYG 平板,置 37 ℃培養(yǎng) 18 h, 各用 5 mL 生理鹽水將平板上的菌落洗下,制備成 濃度均一的凝集原(菌數(shù)為 8×109 CFU/mL),2 ~ 8 ℃保存?zhèn)溆谩?zhǔn)備潔凈的載玻片,用記號(hào)筆分區(qū) 標(biāo)記后,取 20 μL 制備的綠膿桿菌凝集原滴于載玻 片上,再取待檢的水貂血清(簡稱待檢血清) 20 μL 置于凝集原上,同時(shí)取 20 μL 綠膿桿菌凝集 原加 20 μL 生理鹽水作為陰性對(duì)照,取 20 μL 綠膿 桿菌凝集原加 20 μL 綠膿桿菌抗水貂陽性血清(玻 片凝集反應(yīng)至少出現(xiàn)“+++”)作為陽性對(duì)照,用 槍頭將凝集原和待檢血清混合,在 30 ~ 60 s 內(nèi)用 肉眼觀察結(jié)果。